内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因a/b多态性与糖尿病视网膜病易感性的Meta分析_《中国循证医学杂志》

作者：

 曾正洪 , 钟莉 , 王敏 , 雷春利

四川省成都市龙泉驿区第一人民医院内分泌科（成都 610100）;

关键词：

eNOS 糖尿病视网膜病多态性系统评价 Meta分析病例-对照研究

DOI：

10.7507/1672-2531.20150152

视频：

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摘要 全文 图表 视频 参考文献 施引文献 补充材料

目的系统评价内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因a/b多态性与糖尿病视网膜病易感性的相关性。方法计算机检索PubMed、EMbase、The Cochrane Library（2015年第5期）、CBM、CNKI、VIP及WanFang Data数据库，搜集eNOS基因a/b多态性与糖尿病视网膜病易感性的病例-对照研究，检索时限均为建库至2015年5月。由2位评价者独立筛选文献、提取资料，并评价纳入研究的偏倚风险后，采用RevMan 5.2软件进行Meta分析。结果共纳入16个病例-对照研究，合计3 232例糖尿病视网膜病患者和3 555例对照人群。Meta分析结果显示：在总体分析中，eNOS基因a/b多态性与糖尿病视网膜病易感性无相关性［显性模型：OR=0.94，95% CI（0.78，1.15），P=0.57；隐性模型：OR=0.97，95% CI（0.78，1.22），P=0.82；aa vs. bb：OR=0.89，95% CI（0.71，1.12），P=0.32；ab vs. bb：OR=0.94，95% CI（0.77，1.14），P=0.52；a vs. b：OR=0.97，95% CI（0.82，1.14），P=0.70］。在按照种族进行的亚组分析中，eNOS基因a/b多态性与非洲人糖尿病视网膜病有相关性，但与亚洲人和白种人无相关性。结论 eNOS基因a/b多态性可能是非洲人糖尿病视网膜病的危险因子。

引用本文： 曾正洪, 钟莉, 王敏, 雷春利. 内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因a/b多态性与糖尿病视网膜病易感性的Meta分析. 中国循证医学杂志, 2015, 15(8): 898-906. doi: 10.7507/1672-2531.20150152 复制

糖尿病视网膜病是糖尿病常见的微血管并发症之一，其常导致双眼不可逆性盲 ^[1-3]。长期的高血糖是其发生的主要原因，除此之外，遗传因素在糖尿病视网膜眼病发病中起重要作用。目前已发现糖尿病视网膜病与人类白细胞抗原、血管紧张素转换酶、一氧化氮合酶等基因有关 ^[4-8]。其中一氧化氮合酶基因的相关研究较热门。一氧化氮（NO）对视网膜微循环的调节起重要作用，非特异性一氧化氮合酶（NOS）抑制剂可保护视网膜免受缺血损伤，提示NO在糖尿病视网膜病的发病机制中起重要作用 ^[9-23]。近年来，有研究提示内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因第四内含子中27bp可变数目串联重复序列插入/缺失（a/b）多态性与糖尿病视网膜病相关 ^[9-21]。虽已有不少类似研究，但是先前的研究结论不一致。因此，我们采用系统评价和Meta分析方法，对a/b多态性与糖尿病视网膜眼病的相关性进行综合评价，以期为进一步的研究提供基础。

1 资料与方法

1.1 纳入与排除标准

1.1.1 研究类型

病例-对照研究。

1.1.2 研究对象

经临床明确诊断为糖尿病视网膜病的患者。

1.1.3 暴露因素

eNOS基因aa突变。

1.1.4 结局指标

糖尿病视网膜病的发病风险。

1.1.5 排除标准

① 非中、英文文献；② 重复发表的文献；③ 原始研究数据缺失或无法使用，联系作者也不能获得有用数据者；④ 仅有摘要而未找到全文的文献；⑤ 对照组基因型不符合哈迪温伯格平衡（HWE）的研究。

1.2 检索策略

计算机检索PubMed、EMbase、The Cochrane Library（2015年第5期）、CBM、CNKI、VIP和WanFang Data数据库，搜集国内外关于eNOS基因a/b多态性与糖尿病视网膜病相关性的病例-对照研究，检索时限均为建库至2015年5月。同时，追溯纳入文献的参考文献，以补充获取相关文献。检索采用主题词与自由词相结合的方式进行。中文检索词包括：糖尿病、eNOS、多态性、糖尿病视网膜病、糖尿病眼病；英文检索词包括：eNOS、diabetic retinopathy、polymorphism、nitric oxide synthase。以PubMed为例，其具体检索策略见框1。

框 1 PubMed检索策略

#1 eNOS OR nitric oxide synthase

#2 polymorphism

#3 diabetic retinopathy

#4 #1 AND #2 AND #3

1.3 文献筛选、资料提取与纳入研究的偏倚风险评价

由2位评价员独立筛选文献和提取资料，并交叉核对，如遇分歧，则讨论解决。采用自制的资料提取表提取资料，提取内容主要包括：第一作者、发表时间、国家、种族、基因分型方法、病例组和对照组突变基因的频率。纳入研究的偏倚风险采用Newcastle-Ottawa Scale（NOS）进行评价 ^{[24, 25]}。

1.4 统计分析

采用RevMan 5.2软件进行Meta分析。首先，对纳入研究的对照组基因型进行HWE检验，若P＜0.05，则提示对照组基因型不符合HWE。然后，分别计算5种遗传模型（aa+ab vs. bb，aa vs. bb，ab vs. bb，aa vs. ab+bb，a vs. b）下各纳入研究的基因型分布。Meta分析采用OR为效应指标，同时给出点估计值及其95%CI，Meta分析的检验水准设为α=0.10 ^[25]。纳入研究结果间的异质性采用χ²检验进行分析（检验水准设为α=0.1），并结合I²定量判断异质性的大小。若各研究结果间无统计学异质性，采用固定效应模型进行Meta分析；若各研究结果间存在统计学异质性，在排除明显临床异质性的影响后，采用随机效应模型进行Meta分析。明显的临床异质性采用亚组分析（如按人种的不同进行亚组分析）或敏感性分析等方法进行处理，或只行描述性分析。

2 结果

2.1 文献检索结果

初检共获得相关文献346篇，经逐层筛选后，最终纳入15篇文献，包括16个病例-对照研究 ^[9-23]，合计3 232例糖尿病视网膜病患者，3 555例对照人群。文献筛选流程及结果见图 1。

图1 文献筛选流程及结果

图选项

纳入研究	国家	人种	基因分型方法	病例组（例）			对照组（例）			HWE
纳入研究	国家	人种	基因分型方法	bb	ab	aa	bb	ab	aa	HWE
de Syllos 2012^[9]	巴西	白种人	PCR-RFLP	69	29	2	74	23	3	符合
Santos 2012^[10]	巴西	白种人	PCR-RFLP	284	111	12	126	53	5	符合
孙海燕 2004^[11]	中国	亚洲人	PCR-RFLP	108	36	3	133	21	1	符合
张敏 2005^[12]	中国	亚洲人	PCR	108	11	0	170	31	2	符合
岳枚 2011^[13]	中国	亚洲人	PCR-RFLP	125	27	2	118	45	4	符合
Cheema 1 2012^[14]	印度	亚洲人	PCR-RFLP	146	123	28	92	98	23	符合
Cheema 2 2012^[14]	印度	亚洲人	PCR-RFLP	265	221	59	176	172	43	符合
Ezzidi 2008^[15]	突尼斯	非洲人	PCR-RFLP	251	115	17	276	180	33	符合
Awata 2004^[16]	日本	亚洲人	PCR-RFLP	91	25	1	82	24	3	符合
Mehrab-Mohseni 2011^[17]	伊朗	亚洲人	PCR	31	9	1	157	54	9	符合
Petrovic 2008^[18]	斯诺文尼亚	白种人	PCR-RFLP	176	91	16	92	44	7	符合
Cilensek 2012^[19]	斯诺文尼亚	白种人	Taqman	106	51	15	278	114	13	符合
Chen 2007^[20]	美国	非洲人	PCR	41	17	10	117	136	48	符合
Suganthalakshmi 2006^[21]	印度	亚洲人	PCR-RFLP	86	27	7	69	18	3	符合
Narne 2014^[22]	印度	亚洲人	PCR-RFLP	95	52	2	104	55	3	符合
佘重阳 2015^[23]	中国	亚洲人	PCR-RFLP	102	28	0	198	24	1	符合

纳入研究	研究人群选择				组间可比性	暴露因素的测量			合计（分）
纳入研究	①	②	③	④	⑤	⑥	⑦	⑧	合计（分）
de Syllos 2012^[9]	1	1	1	1	2	1	1	1	9
Santos 2012^[10]	1	1	0	1	2	1	1	1	8
孙海燕 2004^[11]	1	1	0	1	2	1	1	1	8
张敏 2005^[12]	1	1	0	1	2	1	1	1	8
岳枚 2011^[13]	1	1	1	0	2	1	1	1	8
Cheema 1 2012^[14]	1	1	1	1	1	1	1	1	8
Cheema 2 2012^[14]	1	0	1	1	2	1	1	1	8
Ezzidi 2008^[15]	1	1	1	1	2	1	1	1	9
Awata 2004^[16]	1	0	1	1	2	1	1	1	8
Mehrab-Mohseni 2011^[17]	1	1	1	1	1	1	1	1	9
Petrovic 2008^[18]	1	1	0	1	2	1	1	1	8
Cilensek 2012^[19]	1	1	1	1	2	1	1	1	9
Chen 2007^[20]	1	1	0	1	2	1	1	1	8
Suganthalakshmi 2006^[21]	1	0	1	1	2	1	1	1	8
Narne 2014^[22]	1	0	1	1	2	1	1	1	8
佘重阳 2005^[23]	1	1	1	1	2	1	1	1	9
① 病例确定是否恰当（1分）；② 病例的代表性（1分）；③ 对照的选择（1分）；④ 对照的确定（1分）；⑤ 设计和统计分析时考虑病例和对照的可比性（2分）；⑥ 暴露因素的确定（1分）；⑦ 采用相同的方法确定病例和对照组暴露因素（1分）；⑧ 无应答率（1分）

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《中国循证医学杂志》

内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因a/b多态性与糖尿病视网膜病易感性的Meta分析

摘要 全文 图表 视频 参考文献 施引文献 补充材料

1 资料与方法

1.1 纳入与排除标准

1.1.1 研究类型

1.1.2 研究对象

1.1.3 暴露因素

1.1.4 结局指标

1.1.5 排除标准

1.2 检索策略

1.3 文献筛选、资料提取与纳入研究的偏倚风险评价

1.4 统计分析

2 结果

2.1 文献检索结果

2.2 纳入研究的基本特征与偏倚风险评价

2.3 Meta分析结果

2.3.1 显性模型

2.3.2 隐性模型

2.3.3 aa vs. bb

2.3.4 ab vs. bb

2.3.5 a vs. b

3 讨论

1 资料与方法

1.1 纳入与排除标准

1.1.1 研究类型

1.1.2 研究对象

1.1.3 暴露因素

1.1.4 结局指标

1.1.5 排除标准

1.2 检索策略

1.3 文献筛选、资料提取与纳入研究的偏倚风险评价

1.4 统计分析

2 结果

2.1 文献检索结果

2.2 纳入研究的基本特征与偏倚风险评价

2.3 Meta分析结果

2.3.1 显性模型

2.3.2 隐性模型

2.3.3 aa vs. bb

2.3.4 ab vs. bb

2.3.5 a vs. b

3 讨论

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