O estudo de biomoléculas, mais concretamente da sua sequência, estrutura e tipo de interações em que estão envolvidas, é importante para compreender a sua função e a sua relação com diferentes doenças. A espectrometria de massa tem provado ser uma metodologia complementar às abordagens tradicionais para o estudo dos sistemas biológicos e que ajuda a aprofundar a sua compreensão. Neste artigo, é apresentada uma revisão do uso de espectrometria de massa acoplada à fotoionização por raios ultravioleta para a análise de proteínas e ácidos nucleicos. Estes métodos são utilizados para estudar alterações na estrutura destas biomoléculas, identificar a presença de modificações e identificar locais de interação com outras moléculas de forma a responder a questões relacionadas com a saúde humana e o desenvolvimento de fármacos.