法医学杂志 ›› 2019, Vol. 35 ›› Issue (2): 143-148.DOI: 10.12116/j.issn.1004-5619.2019.02.003
所属专题: 损伤时间推断
赵建新1,2,3, 金馨1,2,3, 黄俊杰1,2,3, 姚艺1,2,3, 喻林升1,2,3, 范琰琰1,2,3
ZHAO Jian-xin1,2,3, JIN Xin1,2,3, HUANG Jun-jie1,2,3, YAO Yi1,2,3, YU Lin-sheng1,2,3, FAN Yan-yan1,2,3
摘要: 目的 检测乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)在小鼠皮肤切创愈合过程中的时序性表达及分布特征,探讨其在创口愈合中的作用及其作为创口形成时间推断参考指标的可行性。 方法 45只C57BL/KsJ小鼠被随机分为1个对照组和8个切创组。切创组建立皮肤切创模型,分别于伤后6 h、12 h、1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d提取皮肤创口样本;对照组提取未切创的皮肤组织。应用免疫组织化学染色、双重免疫荧光染色及Western印迹法检测皮肤样本中AChE的表达与分布。 结果 免疫组织化学染色结果显示,伤后6~12 h,AChE主要表达于浸润的多形核白细胞;伤后1~3 d,大量浸润的单个核细胞呈现AChE阳性染色;伤后5~14 d,AChE阳性细胞以成纤维样细胞为主。AChE的阳性细胞率于伤后6 h开始增多,伤后1 d达到峰值。双重免疫荧光染色结果显示,AChE阳性的单个核细胞和成纤维样细胞主要为巨噬细胞和肌成纤维细胞。Western印迹法检测结果显示,各切创组AChE表达的相对表达水平均高于对照组,于伤后1 d达到峰值,此后下降,于伤后7 d达到第2个峰值。 结论 皮肤创口愈合期间AChE时序性表达于多形核白细胞、巨噬细胞和肌成纤维细胞,提示其可能参与创口愈合的炎症反应和纤维性修复的调节。联合使用多种方法检测AChE的表达,可以为创口形成时间的推断提供参考依据。