Stadien-abhängige epitheliale Expression des VEGF-Rezeptors 2 während der Lungenentwicklung der Maus

Das VEGF-VEGF-Rezeptor-2 System nimmt eine Schlüsselfunktion in der physiologischen und pathologischen Blutgefäßentwicklung ein. Bisher wurde die Expression des VEGF-Rezeptors 2 (VEGFR-2, Flk-1 im murinen System) ausschließlich im vaskulären Endothel, hämatopoetischen Stammzellen und Endothelprogenitorzellen beschrieben. In aktuellen Befunden wurden jedoch Hinweise auf funktionelle Effekte dieses Liganden-Rezeptorsystems für das pulmonale Epithel sowohl in embryonalen als auch auf das adulten Stadien beschrieben. Auf diesem Hintergrund untersuchten wir die Expression von Flk-1 in verschiedenen Stadien der Lungenentwicklung der Maus auf RNA- und Proteinebene. Rezeptorspezifisches downstream signalling untersuchten wir an frisch isolierten alveolar Typ 2 Zellen der adulten Maus mittels radioaktiver in situ-Hybridisierung, Immunfluoreszenzfärbung, Fluoreszenzmikroskopie und Confokal laser scanning microskopy. Rezeptorspezifische Signaltransduktion wurde mittels Western Blot untersucht. In Endothelzellen ist Flk-1 bereits an Tag E12,5 in den Regionen der Vaskulogenese auf mRNA-Ebene stark exprimiert und wird nach E17,5 deutlich herabreguliert. Die epitheliale Flk-1 Expression, zeigt sich ab E16,5 in proximalem und distalem Lungenepithel ubiquitär. Die postnatale epitheliale Flk-1 Expression ist auf einzelne alveoläre Zellen, Typ 2 Pneumozyten und das bronchiale Epithel beschränkt. Die Immunfluoreszenzfärbungen bestätigten die epitheliale Expression von Flk-1 in den oben genannten Stadien. In frisch isolierten Typ 2 Pneumozyten zeigte sich in der Western Blot Analyse die Expression des Rezeptors und rezeptorspezifische autokrine p42/44 MAPK Aktivierung. Diese Studie zeigt erstmalig eine Stadienabhängige epitheliale Expression des VEGFR-2 im murinen System, zudem rezeptorspezifische autokrine p42/44 MAPK Aktivierung und weist auf eine wichtige Rolle des VEGF-Systems für die Lungenepithel-Reifung und Funktion hin.