Porcine Surfactants verändern Phänotyp und Funktion von Blutmonozyten und Neutrophilen Granulozyten

Fragestellung: Das sich entwickelnde Lungenparenchym ist vulnerabel für entzündliche Prozesse. Durch die physiologische und inflammationsbedingte Einwanderung von Phagocyten (Monozyten und Neutrophile Granulozyten) in den Alveolarraum ändert sich ihr extrazelluläres Milieu aufgrund der Anwesenheit von Surfactantlipiden und -proteinen. In einem ersten Ansatz wurde an Surfactants adulter Schweine (nativ [PNS] und lipidextrahiert [PLS] aus bronchoalveolärer Lavageflüssigkeit [BAL] sowie Curosurf (R)) untersucht, ob diese die Funktion von Phagozyten in Bezug auf die lokalen Bedürfnisse des sensiblen Lungenparenchyms beeinflussen.

Methoden: PNS wurde mittels NaBr-Gradient aus BAL gesunder adulter Schweine gewonnen. PLS wurde durch organische Extraktion aus PNS isoliert. Curosurf (R) wurde vom Hersteller (Nycomed GmbH) zur Verfügung gestellt. Monozyten und Neutrophile Granulozyten gesunder erwachsener Spender wurden mittels Biocoll (R)-Gradient aufgereinigt. Nach Inkubation von IFN(γ-stimulierten [50 I.E./ml] und unstimulierten Monozyten (24, 48h) mit PNS, PLS oder Curosurf® wurden HLA-DR-, CD14-, CD80- und CD86-Expression mittels Durchflusszytometrie [FACS] bestimmt. An Monozyten und Neutrophilen Granulozyten wurde nach Präinkubation von 1h mit PNS, PLS oder Curosurf (R) die basale und PMA-stimulierte [100 nM] intrazelluläre Generierung reaktiver Sauerstoffverbindungen [ROS] mit DHR-Oxidation durch FACS-Analyse dargestellt. Die Gesamt-Produktion (intra-und extrazellulär) der ROS wurde mit Luminol-verstärkter Chemilumineszens (CL) erfasst.

Ergebnisse: Erste Daten zeigen, dass Surfactants zu einer erhöhten basalen und IFNγ-stimulierten HLA-DR- und CD80- Expression von Monozyten nach 48h führten. Die DHR-detektierbare intrazelluläre ROS-Produktion von Monozyten und Neutrophilen Granulozyten war unbeeinträchtigt. Die Freisetzung von ROS hingegen wurde durch die Surfactants bei beiden Phagozytenpopulationen inhibiert.

Schlussfolgerung: Die erhöhte Expression von HLA-DR und CD80 auf peripheren Blutmonozyten nach Inkubation mit porcine Surfactants deutet darauf hin, dass porcine Surfactants den Phänotyp dieser Zellen beeinflussen. Funktionell wird die Freisetzung gewebeschädigender reaktiver Sauerstoffverbindungen aus Monozyten und Neutrophilen Granulozyten vermindert, die intrazelluläre Produktion reaktiver Sauerstoffverbindungen scheint nicht beinträchtigt. Weitere Funktionsuntersuchungen stehen noch aus.