Verbesserte Methode zur Lysinoalaninbestimmung in Lebensmitteln

Summary

A faster method for the determination of lysinoalanine (LAL) was developed which is universally applicable to all kinds of food products and shows a better ability to separate LAL from interference substances. After appropriate sample preparation and liberation of protein bound LAL by acid hydrolysis the protein hydrolysate is directly neutralized with sodium hydroxide/sodium-citrate-solution. LAL is separated by means of an automatic amino acid analyzer with a special short time program for basic amino acids (sodium citrate buffer pH 4.50/0.61 nNa⁺, 60°C, LAL-elution after 55 min) and detected colorimetrically with ninhydrin. There are no interference problems with high concentrations of amino sugars, fructoselysine and lactuloselysine which occur to a considerable degree particularly in heated milk products. As for LAL-absorption on humin substances, recovery and detection limit, there is a difference between pure protein compounds and samples rich in carbohydrates. Depending on the type of sample matrix detection of 10–40 ppm LAL in protein is possible. Exact quantitative determination is limited to 80 ppm LAL in protein. The lowest amount of LAL that can be detected is 10 ng.

Zusammenfassung

Es wird eine gegenüber anderen Verfahren in Auftrennungskapazität und Schnelligkeit verbesserte Methode zur Bestimmung von Lysinoalanin (LAL) beschrieben, die universell zur Untersuchung von Lebensmitteln anwendbar ist. Nach entsprechender Probenaufbereitung und Freisetzung des Lysinolanins durch salzsaure Hydrolyse wird das Eiweißhydrolysat mit Natronlauge/Natriumcitratpuffer direkt neutralisiert. Die Auftrennung erfolgt im Aminosäureanalysator durch ein basisches Kurzzeitprogramm (Citrat-Elutionspuffer pH 4,50/0,61 nNa⁺, 60 °C, LAL-Elutionszeit 55 min) mit Ninhydrinnachweis. Damit kann LAL in fast allen Lebensmitteln ohne nennenswerte Interferenzprobleme bestimmt werden; auch die in manchen Lebensmitteln, vor allem in erhitzten Milchprodukten, üblichen relativ hohen Aminozucker-, Fructoselysin- und Lactuloselysin-Konzentrationen stören die Bestimmung des LAL nicht. Hinsichtlich LAL-Absorption an Huminstoffe, Wiederfindung und Nachweisgrenze ist zwischen kohlenhydratreichen Lebensmitteln und reinen Proteinkomponenten zu unterscheiden. Je nach Probenmatrix ergibt sich eine Nachweisgrenze von 10–40 ppm im Eiweiß. Genaue Bestimmungen können bis zu 80 ppm LAL im Eiweiß durchgeführt werden, die minimale nachweisbare LAL-Menge beträgt bei höchster Empfindlichkeit 10 ng LAL.