The separation of date (Phoenix dactylifera) sterols by liquid chromatography

Summary

Isolation of a crystalline plant sterol mixture from the sarcocarp of the date was followed by successive extraction and column chromatography. The composition of the mixture was examined by gas chromatography. An additional gas chromatographic-mass spectroscopic identification of the sterol mixture was carried out after conversion of the sample into its trimethylsilyl derivates. Cholesterol, campesterol, stigmasterol,β-sitosterol and isofucosterol were found from the identification of molecular ions, the assignment of fragment ions and the comparison of each spectral feature with that of the authentic compound. The sterol mixture was then examined by high-performance liquid chromatography employing a “Zorbax ODS” column and an acetonitrile-water-0.1M sodium acetate (90∶10∶1) solvent system, and the peaks were detected with radiation at 210 nm. Six peaks were found on the chromatogram. The identification of each peak by means of gas chromatography and infrared spectroscopy was followed by the collection of each component. The peaks were an unknown (ghost) peak, isofucosterol, cholesterol, stigmasterol + campesterol, campesterol andβ-sitosterol, successively. The plant sterol mixture has only been analysed on reverse-phase column packings whereas the hormonal corticosteroids and male or female hormonal steroids have been separated on both normal and reverse-phase column packings.

Zusammenfassung

Nach Isolierung aus dem Fruchtfleisch der Dattel wurde ein Gemisch kristallisierter pflanzlicher Sterine der stufenweisen Extraktion und Säulenchromatographie unterworfen. Dessen Zusammensetzung wurde gaschromatographisch untersucht. Außerdem wurde dieses Steringemisch gaschromatographisch-massenspektrographisch nach Überführung in die entsprechenden Trimethylsilylderivate identifiziert. Cholesterin, Campesterin, Stigmasterin,β-Sitosterin und Isofucosterin wurden durch Nachweis der Molekularionen, durch Zuordnung der Fragmentionen und durch Vergleich mit dem spektralen Verhalten der betreffenden authentischen Verbindung festgestellt. Das Steringemisch wurde dann im Wege der Hochleistungs-Flüssigchromatographie untersucht. Hierzu diente eine „Zorbax ods“-Säule und ein Lösungsmittelgemisch aus Acetonitril—Wasser—0,1M Natriumacetat (90 ∶ 10 ∶ 1). Die Peaks wurden durch Lichtstrahlen von 210 nm nachgewiesen. Sechs Peaks wurden gefunden. Nach Identifizierung durch Gaschromatographie und IR-Spektroskopie wurde jede einzelne Verbindung gesammelt. Neben einer unbekannten Zacke entsprachen die Peaks der Reihe nach dem Isofucosterin, dem Cholesterin, Stigmasterin+Campesterin, Campesterin undβ-Sitosterin. Das Gemisch der pflanzlichen Sterine wurde nur mit phasenverkehrten Säulen analysiert, während Corticosteroidhormone sowie männliche und weibliche Steroidhormone sowohl auf normalen wie auf phasenverkehrten Säulenpackungen getrennt wurden.