Herzmuskelzellkulturen neonataler Ratten als alternatives Myokardmodell zum Nachweis der Myokardschädigung durch fremdoberflächen-aktiviertes Serum

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Dissertation

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Abstract

Im Rahmen der extrakorporalen Zirkulation bei herzchirurgischen Eingriffen steht der Myokardschaden im Mittelpunkt des Interesses zahlreicher Arbeitsgruppen. Wir nutzen eine alternative Methode, ein Myokardmodell aus Primärkulturen von Herzmuskelzellen neonataler Ratten. Auf diese Weise untersuchten wir als Korrelat der Myokardschädigung die Freisetzung von Troponin I und AST durch die Zellkulturen. Das Vollblut von 15 gesunden Probanden wurde im Labor durch Zirkulation in einem Herz-Lungen-Maschinen-Modell (HLMM) Fremdoberflächen-kontaktaktiviert. Hierbei wurde für jeden Versuch das Vollblut nur eines einzigen Probanden verwendet. Nach 1 min Zirkulation (Gruppe 1, Kontrolle) sowie nach 2 Stunden Zirkulation (Gruppe 2) wurden Blutproben entnommen und mittels Zentrifugation zu Serumproben verarbeitet. Nach Herstellung Primärkulturen von Kardiomyozyten neonataler (1 - 3 Tage alt) Ratten als Myokardmodell wurden diese über einen Zeitraum von 1, 6 oder 12 Stunden mit einer 20%igen Verdünnung der Serumproben in regulärem Nährmedium inkubiert. Im Überstand der Kulturplatten wurden als Korrelat der Myokardschädigung die Freisetzung von Troponin I und AST Aspartat-Aminotransferase konventionell gemessen. Die Ergebnisse zeigen, dass die Inkubation mit dem Fremdoberflächen-kontaktaktiviertem Serum eine vermehrte Freisetzung von Troponin I und AST aus den kultivierten Herzmuskelzellen bewirkt. In Nährmedium verdünntes Serum eines gesunden Probanden, gewonnen aus Vollblut nach Zirkulation im HLMM, bewirkt in kultivierten Herzmuskelzellen neonataler Ratten eine signifikant erhöhte Freisetzung von Troponin I und AST als Korrelat der Myokardschädigung. Zellkulturen von Kardiomyozyten neonataler Ratten stellen somit ein geeignetes Modell zur Untersuchung herzchirurgischer Fragestellungen bezüglich des Myokardschadens nach extrakorporaler Zirkulation dar.

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Faculties

Medizinische Fakultät

Institutions

Citation

DFG Project uulm

Keywords

Herzmuskelzellkulturen, Myokardmodell, Neonatale Ratten, Herzkrankheit, Herz-Lungen-Maschine, Ischämie, Heart-lung-machine, Myocardial ischemia, Myocytes, cardiac, Rats, DDC 610 / Medicine & health