Resumos

1. INTRODUÇÃO

A ocupação do território brasileiro causou perdas do ponto de vista ambiental e florestal, sendo a obtenção de mudas florestais nativas para serem utilizadas em programas de reposição florestal, recuperação de áreas degradadas, arborização urbana, preservação de espécies nativas, além de outros interesses econômicos, um dos modos de contrabalancear a degradação gerada. A principal forma de propagação das árvores florestais nativas é por meio de sementes, no entanto as disponíveis em populações naturais não são suficientes para atender à demanda, além do que muitas dessas não apresentam qualidade adequada (SILVA; HIGA, 2006SILVA, L. D.; HIGA, A. R. Planejamento e implantação de pomares de sementes de espécies florestais nativas. In: HIGA, A. R.; SILVA, L. D. (Coord.). Pomar de sementes de espécies florestais nativas. Curitiba: FUPEF, 2006. p.13-39.), o que dificulta a produção e o cultivo das mudas.

Gochnatia polymorpha é uma espécie arbórea nativa pertencente à família Asteraceae, com distribuição em vários estados brasileiros e diferentes denominações vulgares, como cambará-do-mato e candeia, em São Paulo, pau-candeia e cambarazinho no Paraná e cambará no Rio Grande do Sul. A espécie é recomendada para arborização urbana, recuperação de ecossistemas degradados e conservação do solo, sendo indicada como planta fixadora de barrancas de rios e reposição de mata ciliar. Além disso, proporciona madeira para obras imersas, construção civil e moirões; o tronco e as raízes produzem curvas para embarcações, carvão e lenha; apresenta características ornamentais e medicinais, sendo as folhas e cascas utilizadas no preparo de chás para afecções bronco-pulmonares; e as flores são melíferas (LORENZI, 1998LORENZI, H. Árvores brasileiras: manual de identificação e cultivo de plantas arbóreas nativas do Brasil. 2.ed. Nova Odessa: Plantarum, 1998. 89p.; GLUFKE, 1999GLUFKE, C. Espécies florestais recomendadas para recuperação de áreas degradadas. Porto Alegre: Fundação Zoobotânica do Rio Grande do Sul, 1999. 48p.; CARVALHO, 2003CARVALHO, P. E. R. Espécies arbóreas brasileiras. Brasília: Embrapa, 2003. v.1. p.274-280.; PIÑA-RODRIGUES et al., 2007PIÑA-RODRIGUES, F. C. M.; FREIRE, J. M.; SILVA, L. D. Parâmetros genéticos para colheitade sementes de espécies florestais. In: PIÑA-RODRIGUES, F. C. M. et al. (Org.). Parâmetros técnicos para produção de sementes florestais. Seropédica: Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, 2007. p.51-102.).

A espécie produz, anualmente, grande quantidade de frutos do tipo cipsela, deiscente, oblongo, preto e sulcado, coroado de um papilho cerdoso e piloso, de 2 a 5 mm de comprimento (CARVALHO, 2003CARVALHO, P. E. R. Espécies arbóreas brasileiras. Brasília: Embrapa, 2003. v.1. p.274-280.). A semente é inclusa no fruto e a coleta deste deve ser feita diretamente da árvore quando iniciar a queda espontânea. Um quilograma de sementes contém aproximadamente 2.200.000 unidades (LORENZI, 1998LORENZI, H. Árvores brasileiras: manual de identificação e cultivo de plantas arbóreas nativas do Brasil. 2.ed. Nova Odessa: Plantarum, 1998. 89p.). De acordo com Carvalho (2003)CARVALHO, P. E. R. Espécies arbóreas brasileiras. Brasília: Embrapa, 2003. v.1. p.274-280., a germinação das sementes é baixa, entre 30 e 50%, e a falta de qualidade fisiológica de espécies florestais nativas pode ser, conforme Silva e Higa (2006)SILVA, L. D.; HIGA, A. R. Planejamento e implantação de pomares de sementes de espécies florestais nativas. In: HIGA, A. R.; SILVA, L. D. (Coord.). Pomar de sementes de espécies florestais nativas. Curitiba: FUPEF, 2006. p.13-39., decorrente do pequeno número de árvores-matrizes disponíveis em populações naturais que se encontram extremamente fragmentadas. Além disso, sementes são estruturas atacadas por patógenos, o que afeta a qualidade e reduz sua capacidade germinativa.

Outro fator limitante na produção e cultivo de mudas florestais nativas é que algumas espécies demoram para iniciar a produção de sementes por apresentarem crescimento lento (CALDAS, 2006CALDAS, L. S. Pomares de sementes de espécies nativas as funções das redes de sementes. In: HIGA, A. R.; SILVA, L. D. (Coord.). Pomar de sementes de espécies florestais nativas. Curitiba: FUPEF, 2006. p.227-241.). Conforme Lorenzi (1998)LORENZI, H. Árvores brasileiras: manual de identificação e cultivo de plantas arbóreas nativas do Brasil. 2.ed. Nova Odessa: Plantarum, 1998. 89p., o desenvolvimento de G. polymorphano campo é rápido, podendo atingir 3 a 4 m em dois anos, entretanto Carvalho (2003)CARVALHO, P. E. R. Espécies arbóreas brasileiras. Brasília: Embrapa, 2003. v.1. p.274-280. mencionou que o crescimento é lento a moderado, com o crescimento em altura bastante expressivo até os 4 anos de idade.

As dificuldades enfrentadas no processo germinativo das sementes e no cultivo das mudas florestais nativas fazem que sejam comercializadas com baixa qualidade e alto custo. No entanto, algumas estratégias podem ser implantadas para amenizar esses problemas. O desenvolvimento de técnicas silviculturais para estimular a germinação de sementes e o crescimento vegetal é incipiente para a maioria das espécies florestais nativas, porém essas tecnologias poderiam beneficiar a produção de mudas (CALDAS, 2006CALDAS, L. S. Pomares de sementes de espécies nativas as funções das redes de sementes. In: HIGA, A. R.; SILVA, L. D. (Coord.). Pomar de sementes de espécies florestais nativas. Curitiba: FUPEF, 2006. p.227-241.).

A interação entre plantas e microrganismos é alternativa sustentável que vem sendo pesquisada e aplicada. Espécies de trichoderma estão entre os fungos mais estudados como agentes no controle biológico de fitopatógenos, na promoção da germinação de sementes e do crescimento vegetal (ALTOMARE et al., 1999ALTOMARE, C.; NORVELL, W.A.; BJORKMAN, T.; HARMAN, G. E. Solubilization of phosphates and micronutrients by the plant-growth-promoting and biocontrol fungus Trichoderma harzianum Rifai 1295-22. Applied and Environmental Microbiology, v.65, n.7, p.2926-2933, 1999.). Diferentes isolados de trichoderma têm levado a aumentos significativos na porcentagem e precocidade de germinação, além de ocasionar aumento no crescimento e produtividade de culturas agrícolas inoculadas com esse bioagente, como tem sido observado em milho (Zea mays), feijão (Phaseolus vulgaris), ervilha (Pisum sativum), grão-de-bico (Cicer arietinum), pepino (Cucumis sativus), pimentão (Capsicum annum), rabanete (Raphanus sativus), tomate (Solanum lycopersicum), alface (Lactuca sativa), cenoura (Daucus carota) e algodão (Gossypium sp.), entre outras (MELO, 1998MELO, I. S. Agentes microbianos de controle de fungos fitopatogênicos. In: MELO, I. S.; AZEVEDO, J. L., (Ed.). Controle biológico. Jaguariúna: Embrapa, 1998. v.1. p.17-60.; YEDIDIA et al., 2001YEDIDIA, I.; SRIVASTVA, A. K.; KAPULNIK, Y.; CHET, I. Effect of Trichoderma harzianum on microelement concentrations and increased growth of cucumber plants. Plant and Soil, v.235, p.235-242, 2001.; HARMAN et al., 2004HARMAN, G. E.; PETZOLDT, R.; COMIS, A.; CHEN, J. Interactions between Trichoderma harzianum Strain T22 and maize inbred line Mo17 and effects of these interactions on diseases caused by Pythium ultimumand Colletotrichum graminicola. Plant Physiology, v.94, n.2, p. 146-153, 2004.; RESENDE et al., 2004RESENDE, M. L.; OLIVEIRA, J. A.; GUIMARÃES, R. M.; PINHO, R. G. V.; VIEIRA, A. R. Inoculações de sementes de milho utilizando o Trichoderma harzianum como promotor de crescimento. Ciência e Agrotecnologia, v.28, n.4, p.793-798, 2004.; JYOTSNA et al., 2008JYOTSNA, A. S.; SRIVASTAVA, A.; SINGH, R. P.; SRIVASTAVA, A. K.; SAXENA, A. K.; ARORA, D. K. Growth promotion and charcoal rot management in chickpea by Trichoderma harzianum. Journal of Plant Protection Research, v.48, n.1, p.81-91, 2008.; HOYOS-CARVAJAL et al., 2009HOYOS-CARVAJAL, L.; ORDUZ, S.; BISSETT, J. Growth stimulation in bean (Phaseolus vulgaris L.) by Trichoderma. Biological Control., v.51. p.409-416, 2009.).

Apesar da inestimável contribuição de espécies de trichoderma em culturas agrícolas, poucos trabalhos têm sido realizados envolvendo esses fungos antagonistas e espécies florestais nativas (DONOSO et al., 2008DONOSO, E. Efecto de Trichoderma harzianum y compost sobre el crecimiento de plántulas de Pinus radiata em viveiro. Bosque, v.29, n.1, p.52-57, 2008.), e os resultados dessa interação poderão otimizar a produção de mudas para os mais diversos interesses e, consequentemente, reduzir o extrativismo de florestas naturais; contribuir nos programas de reflorestamentos no Brasil, acelerando processos de recuperação de áreas degradadas; além da conservação genética das espécies e de benefícios para os produtores em viveiros. Assim, este trabalho objetivou avaliar o efeito de isolados de Trichoderma spp. na emergência de plântulas e no crescimento de mudas de cambará (Gochnatia polymorpha).

2. MATERIAL E MÉTODOS

Os ramos com infrutescências de G. polymorpha foram coletados em janeiro de 2011, em uma população natural, no Distrito Boca do Monte em Santa Maria, RS (29° 41' 43,311''S 53° 48' 41,041''O), sendo uma exsicata incorporada ao herbário do Departamento de Biologia (DB), do Centro de Ciências Naturais e Exatas (CCNE) da Universidade Federal de Santa Maria (UFSM), sob o número de registro SMDB - 13.139. Os frutos (diásporos) foram extraídos manualmente das infrutescências e mantidos em laboratório, à sombra, para secagem natural.

Foram realizados dois experimentos simultâneos em casa de vegetação do DB/CCNE/UFSM, com temperatura controlada a 25 °C. O substrato utilizado em ambos foi composto pela mistura de Tecnomax^® e vermiculita expandida, na proporção 2:1. Em um dos experimentos, empregou-se substrato esterilizado e no outro, substrato não esterilizado. Em cada experimento, utilizaram-se 78 vasos com capacidade para 800 mL, os quais foram preenchidos com 335 g de substrato. A esterilização do substrato foi efetuada em autoclave a 120 °C, durante 1 h e, decorridas 24 h, mais uma hora de autoclavagem, visando eliminar a germinação de possíveis propágulos de resistência de microrganismos do substrato (ETHUR et al., 2005ETHUR, L. Z.; BLUME, E.; MUNIZ, M.; SILVA, A. C. F.; STEFANELO, D. R.; ROCHA, E. K. Fungos antagonistas a Sclerotinia sclerotiorum em pepineiro cultivado em estufa. Fitopatologia Brasileira, v.30, n.2, p.127-133, 2005.). Os vasos contendo substrato esterilizado foram mantidos em bancada separada daqueles com substrato não esterilizado.

Os isolados de trichoderma testados foram: TSM1 e TSM2 de Trichoderma viride, 2B2 e 2B22 de Trichoderma harzianum, que estavam armazenados no Laboratório de Interação Planta-Microrganismo/ CCNE/UFSM. Também, foi testado um mix, preparado com a mistura dos quatro referidos isolados, além de dois produtos comerciais à base de trichoderma: Agrotrich^® e Trichodermil^®, que foram adquiridos direto dos fabricantes. A aplicação dos isolados de trichoderma nos substratos foi através de pós-biológicos, preparados conforme descrição nos parágrafos subsequentes.

Para o preparo dos pós, discos de meio de cultura à base de aveia (40 g de aveia, 20 g de ágar e 1.000 mL de água destilada) contendo micélio e esporos dos isolados foram transferidos sobre 15 0g de arroz umedecido com 25 mL de água destilada em sacos de polipropileno de 500 mL, previamente esterilizados em autoclave a 120 °C durante 1 h e, decorridas 24 h, mais 1 h de autoclavagem. Esse material foi mantido a 25^±3 ºC e fotoperíodo de 12 h por 15 dias. Decorrido esse período, o arroz colonizado pelo fungo foi transferido para envelopes de papel (25 x 17 cm), sendo realizada a secagem em estufa à temperatura de 35^±3 ºC, por cinco dias. Depois de seco, o arroz foi triturado e peneirado. Para estimar as unidades formadoras de colônias por grama de pó (UFC.g^-1), procedeu-se á contagem usando a câmara de Neubauer e a técnica de diluição seriada (FORTES et al., 2007FORTES, F. O.; SILVA, A. C. F.; ALMANÇA, M. A. K.; TEDESCO, S. B. Promoção de enraizamento de microestacas de um clone de Eucapyptussp. por Trichoderma spp. Revista Árvore, v.31, n.2, p.221-228, 2007.).

Realizou-se a introdução dos pós-biológicos nos substratos sete dias antes da semeadura da espécie florestal. Utilizaram-se 2 g de pó biológico por kg de substrato, conforme indicação dos fabricantes dos póscomerciais, sendo essa dose ajustada para que os tratamentos recebessem o equivalente a 10⁶ UFC.g^-1 de pó biológico, com exceção do Trichodermil^®, que possui 10⁸UFC.g^-1. Utilizou-se menor concentração de esporos nos demais tratamentos, com o objetivo de verificar a superioridade de tais esporos quanto à capacidade de promoção de crescimento vegetal em relação ao único produto registrado no Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) (Trichodermil^®), na época da instalação do experimento. Os isolados TSM1, TSM2, 2B2, 2B22 e o mix também foram testados na dose de 4 g de pó por kg de substrato, além do tratamento-controle (sem trichoderma), em cada experimento. Foram semeados 50 diásporos, contendo uma semente cada, por vaso, à profundidade de 0,5 cm. Adicionou-se água destilada nos vasos com o substrato até que este estivesse saturado, sendo essas quantidades de água destilada medidas e utilizadas para irrigação dos vasos, diariamente.

Após sete dias da semeadura, semanalmente foram contadas as plântulas emergidas até o final de 12 semanas, quando se calculou a porcentagem total de emergência, através do número de plântulas emergidas em relação ao número de diásporos colocados para germinar. Também, foi avaliada a primeira contagem de emergência, aos 28 dias, expressa em porcentagem; e o índice de velocidade de emergência (IVE), que foi calculado somando-se o número de plântulas emergidas a cada sete dias e dividido pelo respectivo número de dias transcorridos a partir da semeadura, conforme estabelecido por Maguire em 1962 (NAKAGAWA, 1994NAKAGAWA, J. Testes de vigor baseados na avaliação das plântulas. In: VIEIRA, R. D.; CARVALHO, N. M. Testes de vigor em sementes. Jaboticabal: Funep, 1994. p.49-86.). A porcentagem de plântulas sobreviventes foi determinada no final das 12 semanas, através do número de plântulas sobreviventes em relação ao número de plântulas emergidas.

O efeito do trichoderma no crescimento das mudas foi verificado ao final das 12 semanas, quando foram realizados os seguintes procedimentos de avaliação: para o número de folhas, realizou-se a contagem por plântula, sendo calculada a média aritmética; a altura e o comprimento da maior raiz foram medidos em cm, sendo calculada a média aritmética. Para avaliar a massa fresca da parte aérea e da raiz, as plântulas foram retiradas do substrato, lavadas em água corrente e, a seguir, deixadas para escorrer em papel absorvente. Em seguida, foi feito um corte na base do caule, separando-se a parte aérea da raiz, quando ocorreu a pesagem, em balança com precisão de 0,001 g, da parte aérea e da raiz, separadamente, e foi calculada a média aritmética por plântula. Após ter-se obtido a massa fresca, o material foi colocado em sacos de papel e levado para estufa, mantido à temperatura de 60-65 °C, assim permanecendo até atingir massa constante, quando foi pesado e a média de massa seca da parte aérea e da raiz por plântula determinada (NAKAGAWA, 1994NAKAGAWA, J. Testes de vigor baseados na avaliação das plântulas. In: VIEIRA, R. D.; CARVALHO, N. M. Testes de vigor em sementes. Jaboticabal: Funep, 1994. p.49-86.).

Foram avaliados os seguintes tratamentos em cada experimento: 1) TSM1 dose 1; 2) TSM1 dose 2; 3) TSM2 dose 1; 4) TSM2 dose 2; 5) 2B2 dose 1; 6) 2B2 dose 2; 7) 2B22 dose 1; 8) 2B22 dose 2; 9) mix dos quatro isolados de trichoderrma dose 1; 10) mix dos quatro isolados de trichoderma dose 2; 11) Trichodermil^® dose 1; 12) Agrotrich^® dose 1; e 13) tratamento-controle (sem trichoderma). Optou-se por utilizar substrato esterilizado e não esterilizado, a fim de fazer um estudo da ação dos isolados de trichoderma nos dois ambientes. Nos dois experimentos, os tratamentos foram dispostos em delineamento inteiramente casualizado, com seis repetições por tratamento; cada parcela experimental foi constituída por um vaso contendo 50 diásporos, num total de 300 por tratamento.

Os dados em porcentagem foram transformados por arcosseno da raiz quadrada e os demais, transformados pelo procedimento Box Cox. Em seguida, foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e as médias, comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade de erro, pelo programa estatístico Assistat 7.6 beta (SILVA; AZEVEDO, 2009SILVA, F. A. S.; AZEVEDO, C. A. V. Principal components analysis in the software Assistat-Statistical Attendance. In: WORLD CONGRESS ON COMPUTERS IN AGRICULTURE, 7., 2009, Reno. Proceedings...Reno-NV-USA: American Society of Agricultural and Biological Engineers, 2009.). Os dados que não atenderam às pressuposições da ANOVA foram submetidos ao teste de Kruskal-Wallis pelo programa Action 2.2 (PORTAL ACTION, 2011PORTAL ACTION. Disponível em: http://www.portalaction.com.br. Acesso em: 15 jun. 2011.
http://www.portalaction.com.br... ).

3. RESULTADOS

Em relação aos resultados das variáveis emergência e sobrevivência das plântulas, tanto em substrato esterilizado quanto em não esterilizado, não houve diferença significativa entre os tratamentos com a introdução dos isolados de trichoderma e o tratamentocontrole sem trichoderma (dados não apresentados nas Tabelas 1 e 2).

Quanto à análise de primeira contagem e índice de velocidade de emergência das plântulas, no substrato esterilizado, observou-se que T. harzianumisolado 2B2 dose 1 foi superior ao controle. No substrato não esterilizado, não houve influência dos isolados de trichoderma para as referidas variáveis.

A análise das avaliações das plântulas quanto ao número de folhas demonstrou que os isolados 2B2 e 2B22 de T. harzianum dos e 2 apresentaram as maiores médias em substrato esterilizado. O tratamento com o isolado 2B22 dose 2 também indicou o melhor resultado quanto à altura das plântulas. No substrato não esterilizado, o isolado 2B22 apresentou resultado satisfatório para essas variáveis na dose 2.

Quanto ao comprimento da maior raiz, G. polymorpha apresentou bom crescimento mesmo sem a adição de trichoderma. No substrato esterilizado, o tratamento com resultado satisfatório em relação ao controle foi aquele constituído pelo isolado 2B2 na dose 2, mas a média desse tratamento não diferiu dos tratamentos com os isolados TSM1 dose 2, 2B2 dose 1 e 2B22 dose 1. No substrato não esterilizado, para essa mesma variável, somente o tratamento com o isolado 2B22 dose 2 diferiu do tratamento-controle, mas não diferiu das médias dos tratamentos TSM2 dose 1, 2B2 doses 1 e 2, 2B22 dose 1 e mix dose 2, que não diferiram do tratamentocontrole.

No substrato esterilizado, o isolado que proporcionou a maior média de massa fresca da parte aérea foi o 2B22 na dose 2, diferindo do controle, mas não do tratamento 2B2 dose 2. O isolado que proporcionou a maior média de massa fresca da raiz foi o 2B2 dose 2, que diferiu do controle, mas não dos tratamentos 2B2 dose 1 e 2B22 doses 1 e 2. O isolado que proporcionou a maior média de massa seca de parte aérea e raiz foi o 2B22 dose 2, que diferiu do controle, mas para a massa seca da parte aérea não diferiu do 2B2 dose 2, enquanto para massa seca da raiz não diferiu do 2B2 dose 2 e 2B22 dose 1. Nas análises do substrato não esterilizado, o isolado 2B22 dose 2 também apresentou maior média de massa fresca da parte aérea e da raiz, diferindo do controle, mas não do TSM2 dose 1, 2B2 doses 1 e 2, 2B22 dose 1, mix dose 2, Trichodermil^® e Agrotrich^®. Em relação à massa seca, tanto de parte aérea quanto de raiz, não houve diferença significativa entre os tratamentos.

4. DISCUSSÃO

Os mecanismos de ação dos fungos promotores do crescimento vegetal são específicos e podem variar conforme o ambiente, como substrato, disponibilidade de nutrientes e interferência de outros microrganismos. Nesse sentido, os tratamentos avaliados no substrato esterilizado também foram avaliados em substrato não esterilizado, a fim de se conhecer a resposta dos isolados de trichoderma nos dois ambientes.

O efeito dos isolados de trichoderma observado nas diferentes variáveis analisadas vai ao encontro de Melo (1998)MELO, I. S. Agentes microbianos de controle de fungos fitopatogênicos. In: MELO, I. S.; AZEVEDO, J. L., (Ed.). Controle biológico. Jaguariúna: Embrapa, 1998. v.1. p.17-60., que afirmou que o sucesso da promoção de crescimento vegetal por bioagentes depende das propriedades e mecanismos de ação do organismo. Segundo esse autor, ao introduzir antagonistas no solo pode ocorrer hiperparasitismo entre espécies diferentes de trichoderma, e a introdução de dado isolado no solo pode, ainda, sofrer interferência de outras espécies indígenas, acarretando efeitos diferenciados.

Os resultados evidenciaram que os isolados de trichoderma testados não promoveram a emergência das plântulas de G. polymorpha. Resultados opostos foram encontrados por Kleifeld e Chet (1992)KLEIFELD, O.; CHET, I. Trichoderma harzianum - interaction with plants and effect on growth response. Plant and Soil.v.144, p.267-272, 1992., que observaram a ação positiva de Trichoderma harzianum em tratamento de semente e de solo na emergência de plântulas de feijão (Phaseolus vulgaris), rabanete (Raphanus sativus), tomate (Solanum lycopersicum) e pepino (Cucumis sativus). Luz (2001) verificou aumento significativo na emergência de plântulas de milho (Zea mays) através da microbiolização com T. harzianum isolado T-22, e Diniz et al. (2006)DINIZ, K. A.; OLIVEIRA, J. A.; GUIMARÃES, R. M.; CARVALHO, M. L. M.; MACHADO, J. C. Incorporação de microrganismos, aminoácidos, micronutrientes e reguladores de crescimento em sementes de alface pela técnica de peliculização. Revista Brasileira de Sementes, v.28, n.3, p.37-43, 2006. observaram que a inoculação das sementes de alface (Lactuca sativa) com Trichoderma viride promoveu aumento na emergência das plântulas. Já Ousley et al. (1993)OUSLEY, M. A.; LYNCH, J. M.; WHIPPS, J. M. Effect of Trichoderma on plant growth: a balance between inhibition and growth promotion. Microbial Ecology,. v.26, n.3, p.277-285, 1993.constataram que alguns isolados auxiliaram e outros inibiram a germinação de sementes de alface (L. sativa). Esses resultados indicaram que o mecanismo de promoção de germinação é específico, e alguns isolados podem, ainda, inibir a germinação, o que não foi observado neste estudo.

Na análise de primeira contagem de emergência, em substrato esterilizado, verificou-se que T. harzianum isolado 2B2 dose 1 foi superior ao controle e acelerou a velocidade de emergência. Já em substrato não esterilizado, com essas mesmas variáveis, não se verificou efeito dos isolados de trichoderma sobre a emergência de plântulas de G. polymorpha. Esses resultados demonstraram que para o substrato esterilizado, embora na porcentagem total de emergência não tenha ocorrido diferença significativa, o tratamento com trichoderma proporcionou maior número de plântulas emergidas em menor número de dias, possivelmente por permitir que essas plântulas não fossem atacadas por patógenos habitantes da espermosfera, que poderiam afetar a emergência e estabelecimento das plantinhas. De acordo com Melo (1998)MELO, I. S. Agentes microbianos de controle de fungos fitopatogênicos. In: MELO, I. S.; AZEVEDO, J. L., (Ed.). Controle biológico. Jaguariúna: Embrapa, 1998. v.1. p.17-60., a aplicação de trichoderma não proporciona aumentos significativos somente na porcentagem, mas também na precocidade e velocidade de germinação.

Os resultados s correspondem aos encontrados por Oliveira (2007)OLIVEIRA, G. G. Trichoderma spp. no crescimento vegetal e no biocontrole de Sclerotinia sclerotiorum e de patógenos em sementes de cártamo (Carthamus tinctorius).2007. 80f. Dissertação (Mestrado em Agronomia) - Universidade Federal de Santa Maria, Santa Maria, 2007. em sementes de cártamo (Carthamus tinctorius), espécie também pertencente à família Asteraceae, em que o isolado TC 1.15 de Trichoderma sp. permitiu maior média de plântulas emergidas, mas que não diferiu dos outros tratamentos; no entanto, proporcionou o maior IVE, com diferença significativa. Ozbay et al. (2004)OZBAY, N.; NEWMAN, S. E.; BROWN, W. M. The effect oh the Trichoderma harzianum strains on the growth of tomato seddlings. Acta Horticola. v.635, p.131-134, 2004.observaram que os isolados T22 e T95 de T. harzianum não auxiliaram na emergência do tamateiro, mas aumentaram o crescimento das plântulas.

Fortes et al. (2007)FORTES, F. O.; SILVA, A. C. F.; ALMANÇA, M. A. K.; TEDESCO, S. B. Promoção de enraizamento de microestacas de um clone de Eucapyptussp. por Trichoderma spp. Revista Árvore, v.31, n.2, p.221-228, 2007. concluíram que os isolados ST, E15 e S2 de Trichoderma sp. aumentaram a sobrevivência de microestacas de eucalipto (Eucalyptus sp.). Resultados opostos foram obtidos neste estudo, em que os isolados de trichoderma testados não favoreceram as médias de sobrevivência das plântulas. Todavia, a promoção do crescimento vegetativo de G. polymorpha pôde ser verificada, em substrato esterilizado, pelas análises do número de folhas, altura, comprimento da maior raiz, massa fresca e seca da parte aérea e da raiz, em que foram observados efeitos significativos dos isolados de trichoderma. Segundo Contreras-Cornejo et al. (2009)CONTRERAS-CORNEJO, H. A.; MACÍAS-RODRÍGUES, L.; CORTÉS-PENAGOS, C.; LÓPEZ-BUCIO, J. Trichoderma virens, a plant beneficial fungus, enhances biomass production and promotes lateral root growth through an auxin-dependent mechanism in Arabidopsis. Plant Physiology, v.149, n.3, p.1579-1592, 2009., a aplicação de trichoderma tem proporcionado além de aumentos na porcentagem e precocidade de germinação, assim como no peso de matéria seca, na altura das plântulas e no desenvolvimento das raízes laterais.

Quanto ao número de folhas, observou-se, em substrato esterilizado, que os isolados 2B2 e 2B22 na dose 2 apresentaram melhores resultados em relação ao controle, já na variável altura de plântula somente o isolado 2B22, na mesma dose, foi superior ao controle. Em substrato não esterilizado, o tratamento 2B22 dose 2 também foi o que teve melhores resultados para as referidas variáveis, em relação ao controle. Inbar et al. (1994)INBAR, M. J.; ABRAMSKY, D. C.; CHET, I. Plant growth enhancement and disease control bay Trichoderma harzianum in vegetable seedlings grown under commercial conditions. European Journal of Plant Pathology,v.100, n.5, p.337-346, 1994., estudando o efeito de trichoderma no crescimento de pepineiro, observaram aumento de área foliar em plântulas cultivadas em substrato tratado com o isolado T-203 de T. harzianum. Filho et al. (2008)FILHO, M. R. C.; MELLO, S. C. M. de; SANTOS, R. P. dos; MENÊZES, J. E. Avaliação de isolados de Trichoderma na promoção de crescimento, produção de ácido indolacético in vitro e colonização endofítica de mudas de eucalipto. Boletim de pesquisa e desenvolvimento 226. Brasília, DF: Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, 2008. observaram diferença significativa na altura de mudas de eucalipto (Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla) e de Eucalyptus camadulensispor isolados de Trichoderma sp. Donoso et al. (2008)DONOSO, E. Efecto de Trichoderma harzianum y compost sobre el crecimiento de plántulas de Pinus radiata em viveiro. Bosque, v.29, n.1, p.52-57, 2008. concluíram que T. harzianum promoveu a maior média de altura em plântulas de Pinus radiata.

As mudas de G. polymorpha apresentaram bom crescimento da raiz principal, mas o isolado 2B2 dose 2, no substrato esterilizado, e o isolado 2B22 dose 2, no substrato não esterilizado, exibiram os melhores resultados, em comparação com o tratamento-controle. Harman (2000)HARMAN, G. E. Myths and dogmas of biocontrol. Changes in perceptions derived from research on Trichoderma harzianum T-22. Plant Disease, v.84, n.4, p.376-393, 2000. também obteve maior crescimento de raízes de soja (Glycine max) e de milho (Z. mays) tratadas com T. harzianum T-22 quando comparados com testemunhas não tratados. Fortes et al. (2007)FORTES, F. O.; SILVA, A. C. F.; ALMANÇA, M. A. K.; TEDESCO, S. B. Promoção de enraizamento de microestacas de um clone de Eucapyptussp. por Trichoderma spp. Revista Árvore, v.31, n.2, p.221-228, 2007. observaram que o isolado E15 promoveu o enraizamento de microestacas de eucalipto (Eucalyptus sp.), apresentando aumento significativo na porcentagem de enraizamento.

Em substrato esterilizado, os resultados indicaram efeito positivo do isolado 2B22 dose 2 para a massa fresca da parte aérea, bem como para a massa seca tanto da parte aérea quanto da raiz. Para a variável massa fresca da raiz, o tratamento que obteve melhor resultado comparado ao controle foi o 2B2 dose 2. Em substrato não esterilizado, o isolado 2B22 dose 2 foi superior quanto às variáveis massa fresca da parte aérea e da raiz, no entanto nenhum isolado apresentou efeito sobre a massa seca dessas variáveis.

Segundo Ethur et al. (2005)ETHUR, L. Z.; BLUME, E.; MUNIZ, M.; SILVA, A. C. F.; STEFANELO, D. R.; ROCHA, E. K. Fungos antagonistas a Sclerotinia sclerotiorum em pepineiro cultivado em estufa. Fitopatologia Brasileira, v.30, n.2, p.127-133, 2005., o comportamento de fungos de solo, como trichoderma, pode se modificar quando colocado em outro ambiente. O processo de autoclavagem pode ter acelerado a decomposição da matéria orgânica, causando modificações na solubilidade ou disponibilidade dos nutrientes. Conforme Kleifeld e Chet (1992)KLEIFELD, O.; CHET, I. Trichoderma harzianum - interaction with plants and effect on growth response. Plant and Soil.v.144, p.267-272, 1992., a habilidade de T. harzianum em promover o crescimento de plantas varia com o tipo de substrato, como nutrientes ou matérias orgânicas disponíveis e com a habilidade de competir com patógenos na rizosfera.

Tavares (2009)TAVARES, G. M. Podridão do pé do mamoeiro: infestação de solos de cultivo, controle alternativo com indutores de resistência e Trichoderma e avaliação dos mecanismos de defesa envolvidos. 2009. 121f. Tese. (Doutorado em Fitopatologia) - Universidade Federal Rural de Pernambuco, Recife, 2009. também obteve aumento na biomassa fresca e seca total de plantas de mamoeiro plantadas em solo contendo T. harzianum isolado T70 e Trichoderma virens isolado T68. Resende et al. (2004)RESENDE, M. L.; OLIVEIRA, J. A.; GUIMARÃES, R. M.; PINHO, R. G. V.; VIEIRA, A. R. Inoculações de sementes de milho utilizando o Trichoderma harzianum como promotor de crescimento. Ciência e Agrotecnologia, v.28, n.4, p.793-798, 2004. observaram que T. harzianum estimulou maior acúmulo de matéria seca em plântulas de milho (Z. mays). Filho et al. (2008)FILHO, M. R. C.; MELLO, S. C. M. de; SANTOS, R. P. dos; MENÊZES, J. E. Avaliação de isolados de Trichoderma na promoção de crescimento, produção de ácido indolacético in vitro e colonização endofítica de mudas de eucalipto. Boletim de pesquisa e desenvolvimento 226. Brasília, DF: Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, 2008., avaliando a promoção de crescimento de mudas de um clone híbrido de eucalipto (Eucalyptus grandi x E. urophylla), também observaram que o isolado CEN 162 de Trichoderma asperellum e o isolado CEN 262 de T. harzianum tiveram as maiores médias de massa seca da raiz e da parte aérea.

A propriedade de promoção do crescimento por trichoderma pode estar relacionada com o controle de fungos fitopatogênicos, através, principalmente, das ações de competição, parasitismo direto e antibiose (MELO, 1998MELO, I. S. Agentes microbianos de controle de fungos fitopatogênicos. In: MELO, I. S.; AZEVEDO, J. L., (Ed.). Controle biológico. Jaguariúna: Embrapa, 1998. v.1. p.17-60.), mas também envolve a disponibilização de nutrientes do solo e aumento na captação e translocação de minerais pelo desenvolvimento das raízes da planta (KLEIFELD; CHET, 1992KLEIFELD, O.; CHET, I. Trichoderma harzianum - interaction with plants and effect on growth response. Plant and Soil.v.144, p.267-272, 1992.). Segundo Altomare et al. (1999)ALTOMARE, C.; NORVELL, W.A.; BJORKMAN, T.; HARMAN, G. E. Solubilization of phosphates and micronutrients by the plant-growth-promoting and biocontrol fungus Trichoderma harzianum Rifai 1295-22. Applied and Environmental Microbiology, v.65, n.7, p.2926-2933, 1999., no solo, macro e micronutrientes sofrem equilíbrio dinâmico de solubilização e insolubilização influenciado pela microflora, que afeta a acessibilidade destes para serem absorvidos pelas raízes das plantas. Conforme esses autores, o crescimento vegetal promovido por T. harzianum está na sua habilidade de solubilizar muitos nutrientes importantes para a planta e de produzir hormônios ou outros fatores de crescimento.

Carvalho Filho et al. (2008)CARVALHO FILHO, M. R.; MELLO, S. C. M.; SANTOS, R. P.; MENÊZES, J. E. Avaliação de isolados de Trichoderma na promoção de crescimento, produção de ácido indolacético in vitro e colonização endofítica de mudas de eucalipto. Brasília, DF: Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, 2008. (Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento, 226) observaram produção do hormônio ácido indolacético (AIA) em alguns isolados de Trichodermaspp., sendo em baixos níveis nos isolados CEN 209 e CEN 500 e níveis consideravelmente superiores no isolado CEN 262. Hoyos-Carvajal et al. (2009)HOYOS-CARVAJAL, L.; ORDUZ, S.; BISSETT, J. Growth stimulation in bean (Phaseolus vulgaris L.) by Trichoderma. Biological Control., v.51. p.409-416, 2009. avaliaram a produção de metabólitos de 101 isolados de Trichoderma spp., em que 60% das cepas produziram ácido indolacético (AIA) ou análogos à auxina, 20% foram capazes de produzir formas solúveis de fosfato de rocha fosfática e 8% mostraram capacidade de produzir sideróforos consistentes para converter ferro a formas solúveis.

Sob essa perspectiva, verificou-se que os isolados 2B2 e 2B22 de T. harzianum apresentaram-se potenciais como promotores do crescimento vegetal para algumas das variáveis analisadas em plântulas de G. polymorpha(Figuras 1 e 2). Considerando a importância econômica e ambiental de espécies florestais nativas, esses resultados são relevantes para o aprimoramento de técnicas silviculturais relacionadas à realização de outros estudos que envolvam a promoção de crescimento de mudas florestais por bioagentes, como o trichoderma.

5. CONCLUSÃO

Os isolados de trichoderma testados não interferem na emergência das plântulas, mas os isolados 2B2 e 2B22 de T. harzianum apresentam potenciais como promotores do crescimento vegetal de mudas de cambará (G. polymorpha).

6.AGRADECIMENTOS

À Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES), pela bolsa de mestrado concedida ao primeiro autor.

7. REFERÊNCIAS

Datas de Publicação

Histórico