Estudo comparativo entre o método convencional e o método da peroxidase anti-peroxidase na pesquisa do parasitismo tissular na cardiopatia chagásica crônica

Barbosa, A. J. A.; Gobbi, H.; Lino, B. T.; Lages-Silva, E.; Ramirez, L. E.; Teixeira, V. P. A.; Almeida, H. O.

doi:10.1590/S0036-46651986000200005

Resumos

Na maioria dos chagásicos crônicos o Trypanosoma cruzi não é detectado no tecido ou apresenta se com extrema raridade, mesmo quando é pesquisado exaustivamente. Sendo os métodos utilizados, até então, inespecíficos para a demonstração do T. cruzi, propôs-se no presente trabalho proceder ao estudo comparativo entre o método convencional (HE) e o método imunocitoquímico pela peroxidase anti-peroxidase (PAP), na avaliação quantitativa do parasitismo. Selecionaram-se 3 casos de cardiopatia chagásica crônica e, de um mesmo fragmento de cada caso, obtiveram se cortes que foram corados pelo H.E. (média de 100 cortes por caso) e, consecutivamente, outros que foram corados pelo PAP (média de 70 cortes por caso). O caso n.° 1 foi autopsiado em 1952 e apresentava parasitismo freqüente. Nos demais, o exame rotineiro foi negativo. Obtiveram-se os seguintes resultados expressos em n.° de ninhos/100 cortes, respectivamente, corados pelo H.E. e pelo P.A.P. (HE/PAP). Caso n.° 1 - 80/171; caso n.° 2 = 5/116 e caso n.° 3 = 1/2. Os resultados mostram que o método imunocitoquímico empregado, além de facilitar o diagnóstico do parasitismo, demonstra também pequenos ninhos de amastigotas que dificilmente seriam diagnosticados pelos métodos convencionais; além disso mostrou-se útil mesmo em tecido incluídos em parafina há longo tempo.

Moléstia de Chagas; PAP; Cardiopatia chagásica crônica; Parasitismo cardíaco

In most patients with chronic Chagas disease the Trypanosoma cruzi has been shown to be present in extremely scanty numbers in all tissues extensively studied using conventional non-specific histologic techniques presently available. The present work was carried out in order to compare the immunocytochemical method of peroxidase anti-peroxidase (PAP) with the Haematoxilin and Eosin (HE) technique in the quantification of the parasitism in formalin fixed tissues from chronic chagasic patients. Using the same tissue fragment from each one of 3 cases of chronic chagasic cardiomyopathy, sections were obtained for HE (average: 100 sections per fragment) and for PAP (average: 70 sections per fragment). The fragment from case Nip. 1 was first studied in 1952 and presented with relatively great number of parasites. The results, expressed as amastigotes nests per 100 sections stained by HE and PAP were, respectively (HE — PAP): case No. 1, 80 — 171; case No. 2, 5-116 and case No. 3, 1-2. The present results show that the immunocytochemical method improves the quantitative evaluation of the parasitism in tissues of chronic Chagas disease. Furthemore. it should be preferred not only for the specific diagnosis taut also for quantitative studies on the tissular parasitism even in those tissues included in paraffin wax for long periods of time.

ARTIGOS ORIGINAIS

Estudo comparativo entre o método convencional e o método da peroxidase anti-peroxidase na pesquisa do parasitismo tissular na cardiopatia chagásica crônica(^* Endereço para correspondência e pedidos de Separatas: Alfredo J. A. Barbosa Faculdade de Medicina da UFMG Departamento de Anatomia Patológica e Medicina Legal Av. Prof. Alfredo Balena, 190 30 000 Belo Horizonte Brasil )

A comparative study between Haematoxilin and Eosin and the peroxidase anti-peroxidase stains for tissular parasitism quantification in chronic chagasic cardiomyopathy

A. J. A. Barbosa^I; H. Gobbi^I; B. T. Lino^I; E. Lages-Silva^II; L. E. Ramirez^III; V. P. A. TeixeiraIV; H. O. AlmeidaIV

^IDepartamento de Anatomia Patológica e Medicina Legal da Faculdade de Medicina da UFMG. Av. Alfredo Batena 190, Belo Horizonte, CEP 30000, MG Brasil

^IICentro de Pesquisa René Rachou. FIOCRUZ, Belo Horizonte, MG Brasil

^IIIDepartamento de Parasitologia, Universidade de Antioquia, Medellin, Colombia

^IVDisciplina de Patologia Geral da Faculdade de Medicina do Triângulo Mineiro, Uberaba, MG, Brasil

^{Endereço para correspondência e pedidos de Separatas} Endereço para correspondência e pedidos de Separatas: Alfredo J. A. Barbosa Faculdade de Medicina da UFMG Departamento de Anatomia Patológica e Medicina Legal Av. Prof. Alfredo Balena, 190 30 000 Belo Horizonte Brasil

RESUMO

Na maioria dos chagásicos crônicos o Trypanosoma cruzi não é detectado no tecido ou apresenta se com extrema raridade, mesmo quando é pesquisado exaustivamente. Sendo os métodos utilizados, até então, inespecíficos para a demonstração do T. cruzi, propôs-se no presente trabalho proceder ao estudo comparativo entre o método convencional (HE) e o método imunocitoquímico pela peroxidase anti-peroxidase (PAP), na avaliação quantitativa do parasitismo. Selecionaram-se 3 casos de cardiopatia chagásica crônica e, de um mesmo fragmento de cada caso, obtiveram se cortes que foram corados pelo H.E. (média de 100 cortes por caso) e, consecutivamente, outros que foram corados pelo PAP (média de 70 cortes por caso). O caso n.° 1 foi autopsiado em 1952 e apresentava parasitismo freqüente. Nos demais, o exame rotineiro foi negativo. Obtiveram-se os seguintes resultados expressos em n.° de ninhos/100 cortes, respectivamente, corados pelo H.E. e pelo P.A.P. (HE/PAP). Caso n.° 1 - 80/171; caso n.° 2 = 5/116 e caso n.° 3 = 1/2. Os resultados mostram que o método imunocitoquímico empregado, além de facilitar o diagnóstico do parasitismo, demonstra também pequenos ninhos de amastigotas que dificilmente seriam diagnosticados pelos métodos convencionais; além disso mostrou-se útil mesmo em tecido incluídos em parafina há longo tempo.

Unitermos: Moléstia de Chagas PAP Cardiopatia chagásica crônica Parasitismo cardíaco.

SUMMARY

In most patients with chronic Chagas disease the Trypanosoma cruzi has been shown to be present in extremely scanty numbers in all tissues extensively studied using conventional non-specific histologic techniques presently available. The present work was carried out in order to compare the immunocytochemical method of peroxidase anti-peroxidase (PAP) with the Haematoxilin and Eosin (HE) technique in the quantification of the parasitism in formalin fixed tissues from chronic chagasic patients. Using the same tissue fragment from each one of 3 cases of chronic chagasic cardiomyopathy, sections were obtained for HE (average: 100 sections per fragment) and for PAP (average: 70 sections per fragment). The fragment from case Nip. 1 was first studied in 1952 and presented with relatively great number of parasites. The results, expressed as amastigotes nests per 100 sections stained by HE and PAP were, respectively (HE PAP): case No. 1, 80 171; case No. 2, 5-116 and case No. 3, 1-2. The present results show that the immunocytochemical method improves the quantitative evaluation of the parasitism in tissues of chronic Chagas disease. Furthemore. it should be preferred not only for the specific diagnosis taut also for quantitative studies on the tissular parasitism even in those tissues included in paraffin wax for long periods of time.

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Recebido para publicação em 28/6/1985.

(*) Trabalho realizado com auxílio financeiro da FINEP e CNPq

1. ALMEIDA, H. O.; TEIXEIRA, V. P. A.; GOBBI, H.; ROCHA, A. & BRANDÃO, M. C. Inflamação associada a células musculares cardíacas parasitadas pelo Trypanosoma cruzi, em chagasicos crônicos. Arch. bras. Cardiol., 42-43: 183-186, 1964.
2. ALMEIDA, H. C.; TEIXEIRA, V. P. A. & OLIVEIRA, A. C. F. Flebite com parasitismo em supra-renais de chagásicos crônicos. Arch. bras. Cardiop., 36: 341-344, 1981.
3. ANDRADE, Z. A. Anatomia patológica da doença de Chagas. Rev. goiana Med., 4: 103-119, 1958.
4. ANDRADE, Z. A. & ANDRADE, S. G. Estudo imunocitoquímico da doença de Chagas experimental. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 11: 44-47, 1969.
5. BARBOSA, A. J. A. Método imunocitoquímico para a identificação de amastigotas do Trypanosoma cruzi em cortes histológicos de rotina. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 27: 293-297, 1965.
6. BARBOSA Jr., A. A. & ANDRADE, Z. A. Identificação do Trypanosoma cruzi nos tecidos extra-cardíacos de portadores de miocardite crônica chagásica. Rev. Soc. bras. Med. trap., 17: 123-126, 1984.
7. BOGLIOLO, L. Patologia 3.Ş ed. Rio de Janeiro, Guanabara Koogan, 1981. cap. 13, p. 342-395.
8- DUTTON, G. N.; HAY, J. & RALSTON, J. The immunocytochemical demonstration of Toxoplasma within the eyes of congenitally infected mice. Ann. trop. Med. Parasit. 78: 431-433, 1984.
9. KRETTLI, A. U.; WEISS-CARRIGTON, P. & NUSSENZWEIG, R. S. Membrane-bound antibodies of bloodstream Trypanosoma cruzi in mice: strain differences in susceptibility to complement-mediated lysis. Clin. exp. Immunol., 37: 416-423, 1979.
10. LIUMI, N.; ABRAMOWITZ, A.; LONDNER, M.; OKON, E. & MORAG, A. Immunoperoxidase method of identification of Leishmania in routinely prepared histological sections. Virchows Arch. path. Anat., 401: 147-151, 1983.
11. SOUZA, M. A. & ALENCAR, A. A. On the tissular parasitism of Trypanosoma cruzi Y strain in swiss mice. Rev. Inst. Med. trop. S. Pauto, 26: 316-321, 1984
12. STERNBERGER, L. A. Immunocytochemistry. 2nd ed. New York, John Wiley and Sons, 1979. Chapter 5. p. 104-168.

Endereço para correspondência e pedidos de Separatas:

Alfredo J. A. Barbosa

Faculdade de Medicina da UFMG

Departamento de Anatomia Patológica e Medicina Legal

Av. Prof. Alfredo Balena, 190

30 000 Belo Horizonte Brasil

Datas de Publicação

Publicação nesta coleção
16 Out 2012
Data do Fascículo
Abr 1986

Histórico

Recebido
28 Jun 1985

This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.

[1] 1. ALMEIDA, H. O.; TEIXEIRA, V. P. A.; GOBBI, H.; ROCHA, A. & BRANDÃO, M. C. Inflamação associada a células musculares cardíacas parasitadas pelo Trypanosoma cruzi, em chagasicos crônicos. Arch. bras. Cardiol., 42-43: 183-186, 1964.

[2] 2. ALMEIDA, H. C.; TEIXEIRA, V. P. A. & OLIVEIRA, A. C. F. Flebite com parasitismo em supra-renais de chagásicos crônicos. Arch. bras. Cardiop., 36: 341-344, 1981.

[3] 3. ANDRADE, Z. A. Anatomia patológica da doença de Chagas. Rev. goiana Med., 4: 103-119, 1958.

[4] 4. ANDRADE, Z. A. & ANDRADE, S. G. Estudo imunocitoquímico da doença de Chagas experimental. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 11: 44-47, 1969.

[5] 5. BARBOSA, A. J. A. Método imunocitoquímico para a identificação de amastigotas do Trypanosoma cruzi em cortes histológicos de rotina. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 27: 293-297, 1965.

[6] 6. BARBOSA Jr., A. A. & ANDRADE, Z. A. Identificação do Trypanosoma cruzi nos tecidos extra-cardíacos de portadores de miocardite crônica chagásica. Rev. Soc. bras. Med. trap., 17: 123-126, 1984.

[7] 7. BOGLIOLO, L. Patologia 3.Ş ed. Rio de Janeiro, Guanabara Koogan, 1981. cap. 13, p. 342-395.

[8] 8- DUTTON, G. N.; HAY, J. & RALSTON, J. The immunocytochemical demonstration of Toxoplasma within the eyes of congenitally infected mice. Ann. trop. Med. Parasit. 78: 431-433, 1984.

[9] 9. KRETTLI, A. U.; WEISS-CARRIGTON, P. & NUSSENZWEIG, R. S. Membrane-bound antibodies of bloodstream Trypanosoma cruzi in mice: strain differences in susceptibility to complement-mediated lysis. Clin. exp. Immunol., 37: 416-423, 1979.

[10] 10. LIUMI, N.; ABRAMOWITZ, A.; LONDNER, M.; OKON, E. & MORAG, A. Immunoperoxidase method of identification of Leishmania in routinely prepared histological sections. Virchows Arch. path. Anat., 401: 147-151, 1983.

[11] 11. SOUZA, M. A. & ALENCAR, A. A. On the tissular parasitism of Trypanosoma cruzi Y strain in swiss mice. Rev. Inst. Med. trop. S. Pauto, 26: 316-321, 1984

[12] 12. STERNBERGER, L. A. Immunocytochemistry. 2nd ed. New York, John Wiley and Sons, 1979. Chapter 5. p. 104-168.