ΜΕΛΕΤΗ ΤΩΝ ΑΛΛΗΛΕΠΙΔΡΑΣΕΩΝ ΤΗΣ ΠΑΡΑΘΥΜΟΣΙΝΗΣ ΜΕ ΠΡΩΤΕΙΝΕΣ ΤΟΥ ΚΥΤΤΑΡΟΥ

Abstract

PARATHYMOSIN IS A SMALL ACIDIC PROTEIN WITH WIDE TISSUE DISTRIBUTION. THE AMINOACID SEQUENCE OF THE PROTEIN SHOWS THAT THE ACIDIC AMINOACIDS ARE CLUSTURED INTO THE CENTRAL DOMAIN OF THE PROTEIN, WHEREAS ON THE CARBOXY - TERMINAL THERE IS AN OPERATIVE NLS. THE BIOLOGICAL ROLE OF THIS PROTEIN REMAINS CURRENTLY UKNOWN. THE AIM OF THIS STUDY IS TO IDENTIFY THE MOLECULAR ASSOCIATIONS OF PARATHYHMOSIN, TO INVESTIGATE ITS SUBCELLULAR LOCALIZATION AND STUDY ITS PHOSPHORYLATION AS AN INDICATOR OF POST - TRANSLATION MODIFICATIONS. AT THE FIRST STAGE OF THIS STUDY PARAT WAS ISOLATED AND CHARACTERIZED FROM GOAT LIVER AND A SPECIFIC ANTIBODY AGAINST THE PROTEIN WAS DEVELOPED. THIS ANTIBODY WAS USEDTO IDENTIFY THE SUBCELLULAR LOCALIZATION AND THE PROTEIN WAS LOCALIZED IN THE NUCLEUS. WE DEMONSTRATE THAT PARATHYMOSIN BINDS SPECIFICALLY TO THE LINKER HISTON H1 AND THIS INTERACTION IS ENHANCED BY RINC CATIONS. THIS ASSOCIATION IS MEDIATED BY THE ACIDIC DOMAIN OF PARAT AND THE CENTRAL GLOBULAR DOMAIN OF HISTONE H1. A POTENTIAL ASSOCIATION BETWEEN PARAT CHROMATIN (POLYNUCLEOSOMES)WAS INVESTIGATED BUT NOT SUCH AN INTERACTION WAS OBSERVED. ALSO, IT IS DEMONSTRATED THAT PARATHYMOSIN IS PHOSPHORYLATED BY CASEINE - KINASE II IN VITRO.

Η ΠΑΡΑΘΥΜΟΣΙΝΗ ΕΙΝΑΙ ΜΙΑ ΜΙΚΡΗ ΟΞΙΝΗ ΠΡΩΤΕΙΝΗ, ΜΕ ΕΥΡΕΙΑ ΙΣΤΙΚΗ ΚΑΤΑΝΟΜΗ. Ο ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΣ ΤΗΣ ΠΡΩΤΟΤΑΓΟΥΣ ΤΗΣ ΔΟΜΗΣ ΕΔΕΙΞΕ ΟΤΙ ΤΑ ΟΞΙΝΑ ΑΜΙΝΟΞΕΑ ΕΙΝΑΙ ΣΥΣΣΩΡΕΥΜΕΝΑ ΣΤΟ ΚΕΝΤΡΙΚΟ ΤΜΗΜΑ ΤΗΣ, ΕΝΩ ΣΤΟ -COOH ΑΚΡΟ ΥΠΑΡΧΕΙ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΚΟ ΠΕΠΤΙΔΙΟ ΟΔΗΓΟΣ ΣΤΟΝ ΠΥΡΗΝΑ. Ο ΒΙΟΛΟΓΙΚΟΣ ΡΟΛΟΣ ΤΗΣ ΠΡΩΤΕΙΝΗΣ ΠΑΡΑΜΕΝΕΙ ΑΓΝΩΣΤΟΣ. ΣΚΟΠΟΣ ΑΥΤΗΣ ΤΗΣ ΕΡΓΑΣΙΑΣ ΕΙΝΑΙ ΝΑ ΜΕΛΕΤΗΘΟΥΝ ΑΛΛΗΛΕΠΙΔΡΑΣΕΙΣ ΤΗΣ ΠΑΡΑΘΥΜΟΣΙΝΗΣ ΜΕ ΑΛΛΕΣ ΠΡΩΤΕΙΝΕΣ ΤΟΥ ΚΥΤΤΑΡΟΥ, ΝΑ ΕΝΤΟΠΙΣΘΕΙ Η ΘΕΣΗ ΤΗΣ ΣΤΟ ΚΥΤΤΑΡΟ ΚΑΙ ΝΑ ΜΕΛΕΤΗΘΕΙ Η ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΤΗΣ ΝΑ ΦΩΣΦΟΡΥΛΙΩΝΕΤΑΙ. ΣΤΟ ΠΡΩΤΟ ΣΤΑΔΙΟ ΤΗΣ ΜΕΛΕΤΗΣ ΕΓΙΝΕ ΑΠΟΜΟΝΩΣΗ ΤΗΣ ΠΑΡΑΘΥΜΟΣΙΝΗΣ ΑΠΟ ΗΠΑΡ ΑΙΓΟΣ ΚΑΙ ΑΝΑΠΤΥΧΘΗΚΕ ΕΙΔΙΚΟ ΑΝΤΙΣΩΜΑ ΕΝΑΝΤΙ ΤΗΣ ΠΡΩΤΕΙΝΗΣ. ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΩΝΤΑΣ ΤΟ ΑΝΤΙΣΩΜΑ ΑΥΤΟ ΔΙΑΠΙΣΤΩΘΗΚΕ ΟΤΙ Η ΠΡΩΤΕΙΝΗ ΒΡΙΣΚΕΤΑΙ ΣΤΟΝ ΠΥΡΗΝΑ ΤΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΠΟΥ ΜΕΛΕΤΗΘΗΚΑΝ. Η ΔΙΕΡΕΥΝΗΣΗ ΤΩΝ ΑΛΛΗΛΕΠΙΔΡΑΣΕΩΝ ΤΗΣ ΠΑΡΑΘΥΜΟΣΙΝΗΣ ΜΕ ΑΛΛΕΣ ΠΡΩΤΕΙΝΕΣ ΤΟΥ ΚΥΤΤΑΡΟΥ ΕΔΕΙΞΕ ΟΤΙ Η ΠΑΡΑΘΥΜΟΣΙΝΗ ΣΥΔΕΕΤΑΙ ΕΙΔΙΚΑ ΜΕ ΤΗΝ ΙΣΤΟΝΗ Η1 ΚΑΙ Η ΣΥΝΔΕΣΗ ΑΥΤΗ ΕΝΙΣΧΥΕΤΑΙ ΑΠΟ ΙΟΝΤΑ ZN^2+. Η ΚΕΝΤΡΙΚΗ ΠΕΡΙΟΧΗ ΤΗΣ ΠΑΡΑΘΥΜΟΣΙΝΗΣ ΚΑΙ Η ΣΦΑΙΡΙΚΗ ΠΕΡΙΟΧΗ ΤΗΣ ΙΣΤΟΝΗΣ Η1 ΣΥΜΜΕΤΕΧΟΥΝ ΣΤΗΝ ΣΥΝΔΕΣΗ ΤΩΝ ΔΥΟ ΠΡΩΤΕΙΝΩΝ. ΕΠΙΣΗΣ ΜΕΛΕΤΗΘΗΚΕ ΠΙΘΑΝΗ ΣΥΝΔΕΣΗ ΤΗΣ ΠΑΡΑΘΥΜΟΣΙΝΗΣ ΜΕ ΤΑ ΠΟΛΥΝΟΥΚΛΕΟΣΩΜΑΤΑ ΑΛΛΑ ΔΕΝ ΠΑΡΑΤΗΡΗΘΗΚΕ ΑΛΛΗΛΕΠΙΔΡΑΣΗ ΤΟΥΣ. ΚΑΤΑ ΤΗΝ ΔΙΑΡΚΕΙΑ ΤΗΣ ΕΡΓΑΣΙΑΣ ΑΥΤΗΣ ΜΕΛΕΤΗΘΗΚΑΝ ΠΙΘΑΝΕΣ ΜΕΤΑΜΕΤΑΦΡΑΣΤΙΚΕΣ ΤΡΟΠΟΠΟΙΗΣΕΙΣ ΤΗΣ ΠΑΡΑΘΥΜΟΣΙΝΗΣ ΚΑΙ ΕΙΔΙΚΟΤΕΡΑ Η ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΤΗΣΝΑ ΦΩΣΦΟΡΥΛΙΩΝΕΤΑΙ IN VITRO. ΔΙΑΠΙΣΤΩΘΗΚΕ ΟΤΙ Η ΠΑΡΑΘΥΜΟΣΙΝΗ ΦΩΣΦΟΡΥΛΙΩΝΕΤΑΙ IN VITRO ΑΠΟ ΤΗΝ ΚΙΝΑΣΗ ΤΗΣ ΚΑΖΕΙΝΗΣ ΙΙ.