Konfokalmikroskopische Untersuchungen des Kehlkopfepithels

 

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Zusammenfassung

Hintergrund: Die Abklärung von Stimmlippenveränderungen erfordert eine Operation, bei der zumeist die makroskopischen Veränderungen angegangen werden. Es gibt bislang kein Verfahren, welches zuverlässig in vivo die zellulären Strukturen bis zur Basalmembran darzustellen vermag. In Vorbereitung der konfokalen Laser-Scanning-Mikroskopie (LSM) für den In-vivo-Einsatz in der Laryngologie werden Untersuchungen an Kehlkopfpräparaten ex vivo vorgenommen. Methode: Für die Untersuchungen wurde ein konfokales Laser-Scanning-Mikroskop verwendet, eine Kombination aus dem Heidelberg Retina Tomographen und dem Rostock Cornea Modul. Bei allen Untersuchungen wurde ein 63 × Wasserimmersionsmikroskop eingesetzt. Patienten: Insgesamt 7 Kehlkopfpräparate von Patienten im Alter zwischen 54 und 62 Jahren mit transglottischem T4-Larynxkarzinom wurden konfokal-mikroskopisch untersucht und die Befunde mit denen der histologischen Schnittpräparate verglichen. Ergebnisse: Bei den makroskopisch gesund imponierenden Kehlkopfabschnitten ließen sich das Stimmlippenepithel, die Basalzellschicht und die Lamina propria darstellen. Ferner gelang es, die unterschiedliche Schichtung der Lamina propria mit dem Reinke-Raum und dem Ligamentum vocale darzustellen. Entzündungen ließen sich mit der LSM zuverlässig vom gesunden Epithel unterscheiden. Sowohl Dysplasien als auch Karzinome kamen mit der LSM zur Darstellung. Schlussfolgerungen: Mit der LSM lässt sich die Basalzellschicht im gesunden, entzündeten und gering keratotischen Stimmlippenepithel visualisieren, eine Voraussetzung für den In-vivo-Einsatz der LSM in der Laryngologie. Bei starken Epithelhyperplasien und Hyperkeratosen gelingt dieses jedoch nicht.

Abstract

Background: To evaluate mucosal changes of the true vocal cord, e. g. leukoplakia, microlaryngoscopy is needed to obtain tissue for histopathologic investigation. But there is a discrepancy between the amount of representative tissue necessary for pathology and the postoperative voice function. Thus, a diagnostic procedure that enables the surgeon to differentiate inflammation from dysplasia and carcinoma in situ intra-operatively is urgently needed. We are now reporting on our results using laser scanning microscopy to visualize larynx epithelia. Methods: The laser scanning microscope used in this ex vivo study is a combination of the Heidelberg Retina Tomograph HRTII and the Rostock Cornea Module. A 63 × water immersion objective lens was used for imaging. Patients: Seven larynx preparations of patients (age 54 to 62 years) with a T4 larynx carcinoma who underwent laryngectomy between 2003 and 2006 were examined. Results: Areas of epithelia of the true vocal cord of macroscopically normal appearance supplied images of healthy, but also inflamed laryngeal epithelia. The corresponding histopathologic sections prepared horizontally confirmed the regularity and homogeneity of the mucosa. The different layers of the lamina propria can be separated. In contrast to healthy and inflamed laryngeal mucosa, dysplasia, precancerous lesions and carcinoma-atypical cells were visible. In the latter entity a loss of cellular junctions characterized by lack of visualization of the cell membrane was apparent. Conclusions: LSM supplies information of healthy, inflamed, but also pre-malignant and malignant mucosa changes of the larynx. The pilot study shows that both hyperkeratosis and extensive hyperplasia confine the visualization of the basement cell layer. Research projects have been initiated with the objective to develop a rigid endoscope with integrated LSM technology.

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PD Dr. med. Tino Just

Klinik und Poliklinik für Hals-Nasen-Ohrenheilkunde, Kopf- und Halschirurgie

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Email: tino.just@med.uni-rostock.de