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DOI: 10.1055/s-2005-867773
Annexin V-CLIO-Cy5.5: Ein superparamagnetischer Nanopartikel für die Apoptose-Bildgebung mittels MRT
Ziele: Entwicklung eines Fluoreszenz-markierten, magnetischen Nanopartikels für die Apoptose-Bildgebung mittels Magnetresonanztomographie (MRT) und dessen Anwendung für die In-vivo-Bildgebung von Ischämie-Reperfusionsschäden an Mäuse-Herzen. Methode: Superparamagnetische CLIO-Partikel (Crosslinked Iron Oxide Particles) wurden mit dem Nahinfrarot Farbstoff Cy5.5 markiert und dann für die kovalente Bindung von SH-Gruppen-tragenden Molekülen durch den heterofunktionellen Kreuzvernetzer SPDP (N-Succinimidyl 3-(2-Pyridyldithio)propionat) aktiviert. In das Protein Annexin V, ein Standardmarker für Apoptose, wurde mittels SATA (N-Succinimidyl S-Acetylthioacetate) etwa 1 geschützte SH-Gruppe je Protein eingeführt, sodass die Bindungsaktivität weitestgehend erhalten blieb. Die Reaktion von aktivierten SPDP-CLIO-Cy5.5 und Annexin V resultierte in so genannten Annexin V-CLIO-Cy5.5 Partikeln. Für die MR-Bildgebung des Ischämie-Reperfusion-Syndroms des Herzens wurden Mäusen temporär der RIVA (Ramus interventikularis anterior) unterbunden. Nach i.v. Injektion von Annexin V-CLIO-Cy5.5 wurden diese der MR-Bildgebung und anschließend der Histologie zugeführt. Ergebnis: Durch Optimierung der Synthese konnten Annexin V-CLIO-Cy5.5 Partikel für die MRT der Apoptose hergestellt werden, die eine hohe Spezifität für apoptotische Zellen aufweisen und zusätzlich für die Histologie und Nahinfrarot-Bildgebung mit dem Nahinfrarotfarbstoff Cy5.5 markiert sind. Nach Injektion konnte im Ischämie-Reperfusionsmodell mittels MRT eine Anreicherung dieser magnetischen Nanopartikel durch einen Signalverlust in T2-gewichteten Sequenzen in den von der Ischämie betroffenen Anteilen der vorderen Ventrikelwand nachgewiesen werden. Schlussfolgerung: Nach i.v. Injektion von Annexin V-CLIO-Cy5.5 kann am Ischämie-Reperfusionsschäden das geschädigte Myokardareal MR-tomographisch in vivo visualisiert werden.
Korrespondierender Autor: Schellenberger A
Charité, Campus Mitte, Institut für Radiologie, Schmumannstr. 20/21, 10117, Berlin
E-Mail: eyk.schellenberger@charite.de
Key words
apoptose - MRT - annexin - Bildgebung