Biochemische und histochemische Untersuchungen am Amyloid

Zusammenfassung

Aus einer menschlichen Amyloidleber wurde durch Extraktion mit kaltem Phenol ein Mucoproteid isoliert, das 6,3% N-Acetylneuraminsäure, 7,5% Galaktosamin, 6,3% Glucuronsäure, 8,2% Hexosen (Mannose und Galaktose) und 8,9% Aminosäurenstickstoff enthielt. Als Aminosäuren ließen sich Alanin, Arginin, Asparaginsäure, Glutaminsäure, Glycin, Histidin, Isoleucin, Leucin, Lysin, Methionin, Phenylalanin, Prolin, Serin, Threonin und Valin nachweisen. Gegenüber dem Grippevirus verhielt sich das Mucoproteid als Antikörper.

Daneben wurde durch die Phenolextraktion eine zweite neuraminsäurefreie, zuckerhaltige Substanz freigesetzt, während ein drittes Polysaccharid nicht aus dem Amyloidkomplex abgespalten werden konnte.

Durch Hyaluronidase, Amylase und Papain wird die Amyloidsubstanz im histologischen Präparat nicht angegriffen.

Bei Freisetzung der Neuraminsäure im histologischen Präparat sowie bei Extraktion des neuraminsäurehaltigen Mucoproteids mit kaltem Phenol verliert die Amyloidsubstanz die Fähigkeit zur Metachromasie mit Kresylviolett und Methylviolett und die zum Dichroitismus mit Kongorot. Das neuraminsäurehaltige Mucoproteid im Amyloid ist also Träger der Fähigkeit zur metachromatischen Färbbarkeit und zum Dichroitismus mit Kongorot.

Summary

A mucoprotein was isolated from a human liver with amyloid by extraction with cold phenol. The following chemical constituents were elicited: 6,3 % N-acetyl neuraminic acid, 7,5% galactosamine, 6,3% glucuronic acid, 8,2% hexoses (mannose and galactose) and 8,9% amino acid nitrogen. Amino acids present were alanine, arginine, asparagine, glutamic acid, glycine, histidine, isoleucine, lysine, methionine, phenylalanine, proline, serine, threonine and valine. The mucoprotein behaved as an antibody against the influenza virus.

In addition, a second substance containing sugar and free of neuraminic acid was isolated with the phenol extraction; a third polysaccharid could not be extracted from the amyloid complex.

The amyloid substance is not attacked in histological preparations by hyaluronidase, amylase or papain.

With the freeing of neuraminic acid in histological preparations as well as with the extraction of the mucoprotein containing neuraminic acid by cold phenol, the amyloid substance looses its possibility of metachromatic staining by cresyl-violet and methylviolet and its dichroism with congo red. The mucoprotein containing neuraminic acid is responsible for the ability to take the metachromatic stain and for the dichroism with congo red.